告别“盲人摸象”：PLATO实现高分辨率空间蛋白质组学检测

【蜂耘网 仪器仪表】近年来，空间组学技术已成为解析组织异质性和复杂细胞相互作用的重要工具。尤其是空间转录组学，在胚胎发育、神经科学和疾病机制研究中展现了巨大潜力。然而，作为直接执行生物功能的核心分子，蛋白质的空间分布研究在技术上面临诸多挑战。现有空间蛋白质组学技术受限于质谱检测通量和高昂成本，难以兼顾高分辨率与大面积组织分析需求，限制了其在复杂组织研究中的广泛应用。

2025年1月23日，中国科学院动物研究所赵方庆团队联合国家蛋白质科学中心（北京）王贵宾在Cell发表了题为“High-resolution spatially resolved proteomics of complex tissues based on microfluidics and transfer learning”的研究论文。该研究提出了全新的空间蛋白组学技术框架——PLATO，通过整合微流控技术、微量蛋白质组学技术以及人工智能深度学习算法，实现了全组织切片水平的高分辨率空间蛋白质组检测（25微米分辨率，数千个蛋白），突破了高通量原位组学技术的瓶颈。

研究背景 现有空间蛋白质组方法主要依赖抗体染色或质谱技术，前者因靶标数量有限，仅能检测几十至几百种蛋白分子；而后者尽管检测种类丰富，但逐点取样的方式极大增加了实验成本和规模。例如，对1平方厘米的组织切片进行100微米分辨率的网格分析，需要检测上万个LC-MS/MS样本，远超出现有质谱检测通量的能力。

研究创新与优势

 01 基于微流控的平行流高效蛋白采样技术

在原位采样方面，PLATO结合微流控技术，开发了高通量、低成本的灵活采样平台，可实现25至100微米分辨率范围内进行精确采样。相比传统方法，PLATO通过并行原位采样显著提高了实验效率，同时降低了对复杂昂贵设备的依赖，使得这一技术更加经济实用，为复杂组织的高分辨率空间解析提供了可靠工具。

研究团队通过计算模拟、显微切割和免疫荧光验证了PLATO的高精确性，结果显示其能够准确重构组织切片中蛋白分子的空间分布，空间分辨率最高达到25微米。此外，针对不同类型样本（如冰冻切片和FFPE组织）分别建立了实验流程，证明了PLATO在多种组织类型中的广泛适用性。研究团队进一步对小鼠脑组织、肠道绒毛及乳腺癌等复杂组织进行了高分辨率蛋白质空间分布解析，进一步验证了其在不同应用场景及研究方向中的巨大潜力，为揭示蛋白质动态分布和探究复杂生物过程的分子机制提供了强有力支持。

图1. PLATO的微流控芯片装置图和原位采样结果

02 微量蛋白质组学技术平台

微量蛋白质组学技术的核心挑战是微量样本的定性与定量性能以及数据采集日通量，这也是准确重构空间蛋白表达图谱的基础条件。本研究依托于国家蛋白质科学中心（北京）的蛋白质组学技术平台，通过优化微量蛋白质组学样本制备技术和色谱质谱技术，利用Q Exactive HF(Thermo Scientific)质谱检测器在26分钟洗脱梯度下以每日最多可检测40个样本的高通量速度实现了微量样本（30ng/μL×1μL，30ng/μL×2μL，30ng/μL×4μL，30ng/μL×8μL）的准确可重复定性与精确定量。此外，不同微量样本的蛋白质谱定量结果也表现较高的定量准确度，为准确重构空间蛋白表达图谱提供了高效可靠的技术支持（图2）。 图2.微量蛋白质组学技术的性能评价

03 算法创新：基于“降维编码”与“升维解码”的空间重构算法

PLATO从断层扫描成像的重构原理汲取灵感，通过降维后的平行流投影（parallel flow projection）与深度学习算法Flow2Spatial相结合，成功重构出蛋白质的高分辨率空间分布。Flow2Spatial巧妙运用了自编码器模型，将平行流投影的实验过程模拟为“降维编码”，并通过整合其他空间组学数据（如组织学染色、空间转录组学等），对蛋白质空间分布进行高精度“升维解码”。这一原创算法突破了传统技术难以获取空间信息的限制，不仅大幅提高了空间蛋白质组的覆盖度和分辨率，还为解析其他组学分子的空间分布提供了新方案。

 图3.基于深度学习算法的蛋白质空间分布重构流程图

拓 展

PLATO具有较低的技术壁垒以及对高精尖仪器的依赖水平，只需要简单地将PDMS板夹在组织载玻片上即可，未受过微流控技术培训的研究人员也可以轻松做到；此外，本研究中的数据来自于Q Exactive HF(Thermo Scientific)质谱检测器在26分钟梯度的检测结果，提示PLATO高精尖仪器依赖性低，同时，该框架的高度扩展性可以在更先进的仪器上表现出更高的样本通量和蛋白覆盖深度。

PLATO以人工智能算法、微量蛋白质组学技术和微流控的深度融合，实现了空间组学技术的重要突破。随着技术迭代创新， PLATO有望成为推动生命科学研究的核心工具，并在疾病诊断、精准医学和生命科学等领域发挥重要作用。

中国科学院动物研究所博士后胡倍瑜、博士后何睿乔、博士研究生庞琨及国家蛋白质中心（北京）蛋白质组学技术平台博士王贵宾为该研究的共同第一作者，中国科学院动物研究所赵方庆研究员和冀培丰副研究员为该研究的通讯作者。该项目得到了国家杰出青年科学基金、国家重点研发计划和北京市自然科学基金等项目资助以及国家蛋白质科学中心（北京）蛋白质组学技术平台的支撑和帮助。

（蜂耘仪器仪表网 责任编辑：似也）